Western Blot Testi

Western blot testi, laboratuvarlarda mikro veya makro ELİSA yöntemiyle HIV pozitif bulunan yani AİDS şüphesi taşıyan hastaların tahlil sonuçlarını doğrulamak için kullanılan bir konfirmasyon (doğrulama) testidir. Bu testte HIV antikorlarının varlığını ortaya çıkaran ve bunun anlaşılması için renk değişikliklerine yol açan bir enzim kullanılır.Bu test sonucu da pozitif olan kişiler HIV enfeksiyonu geçirdiğine karar verilir.
Testin kullanılmasında temel amaç ise ELISA  test sonuçlarına göre yalancı pozitif çıkan test sonuçlarının ekarte edilmesi ve kesin HIV enfeksiyonu tanısının koyulmasıdır.

Western Blot Testi Nedir:

Western Blot günümüz modern tıbbında moleküler biyolojide protein solüsyonunda aranan bir proteinin olup olmadığını ve varsa ne kadar olduğunu anlamak için kullanılan bir tahlil yöntemdir.Tıbbi çalışmalarda  en çok mikro ELİSA veya makro ELİSA yöntemleri ile HIV (+) bulunan yani AİDS olduğu şüphelenilen kan örneklerinin doğrulanmasında kullanılan bir tahlil yöntemidir.
Western Blot testi pozitif çıkmayan ancak ELISA test sonucu pozitif olan sonuçlar ise yalancı HIV pozitif sonuç olarak yorumlanmalıdır.
Western blot testi özellikle viroloji laboratuarlarında çalışılmaktadır. Maliyeti yüksek ve özel ekipman ile deneyimli eleman gerektiren bir tahlil yöntemi olduğu için her laboratuvarda çalışılan bir tahlil değildir.
Sağlık Bakanlığı kontrolündeki referans laboratuarlarında HIV enfeksiyonu şüpheli kişilerin kesin  tanısını koymak amacıyla kullanılmaktadır. Bu konuda en güvenilir testdir. İlgili sağlık merkezinde HIV yönünden şüpheli bulunan veya pozitif kan örnekleri bu testin yapılması için doğrulayıcı referans aboratuvara örnek gönderir.

Western Blot Testi Tekniği

Western blot testi ile HIV virüsüne ait protein antijenlerini analiz edilir. Test tekniğinde İlk olarak, antijenler bir jel üzerinde elektroforez ile ayrılır. Hemen ardından ise  blotlama yoluyla örnek katı bir zara aktarılır.
Zar, antikorlarla inkübe edilir yani proteinlerin saptanması için kuluçkaya yatırılır. Daha sonra bağlı antikorlar, enzimatik veya radyoaktif yöntemlerle tespit edilir.
Western blot testi az miktarda olan antikoru bile  tespit etmek için kullanılır.

Western Blot Testi Tekniği ve uygulanması ile ilgili özet bir bilgi aşağıda verilmiştir:

Şüpheli kişiden alınan kan örneklerine Sds-page yöntemi uygulandıktan sonra, elektro blotting yöntemiyle tesbit edilen proteinler bir membrana geçirilir.
Bu işlemin ardından çeşitli solüsyonlarla işleme tabi tutulan memrandaki proteinlere spesifik antikorlar bağlanır. Bu antikorların tespit edilmesiyle proteinin olup olmadığı, çıkan bantların kalınlığının kontrol bantlarıyla karşılaştırılmasıyla da ne kadar olduğu anlaşılır. 

Western Blot Testi Nasıl Yorumlanır?

Hastanın serumundan herhangi bir HIV antikoru var ise, substrat varlığında renkli bir bant oluşacak ve buna göre test pozitif sonuç verecektir. Viral proteinlerin tanımlanmasına izin vermek için pozitif ve negatif kontrol serum örnekleri de aynı anda çalışılmalıdır. Bu teknik testin güvenilirliği yönünde önemli bir araçtır.
Sonuç olarak Western Blot testi HIV  virüsüne dair  protein varlığını araştıran ve protein varsa da bunun düzeyini ölçen ve kesin HIV tanısında altın standart olarak kabul edilen değerli bir tahlil yöntemidir. 

Western Blot Testi HIV enfeksiyonu tanısında neden altın standarttır?

HIV enfeksiyonu kesin tanısı ELISA testleri ile konulamaz.Bu nedenle pozitif çıkan ELISA testlerinin doğrulanması önem taşır. Bu nedenle Western blot testi tercih edilir. Bu test kan proteinlerini ayırır ve HIV enfeksiyonunu gösteren spesifik proteinleri (HIV antikorları olarak adlandırılır) tespit eder. Yani virüse ait pooteinleri direkt olarak saptadığı için HIV enfeksiyonı tanısında altın standart olarak kabul edilir.

Bu konuya dair bir sorunuz varsa siz de uzmanlarımıza 7/24 Soru sorabilirsiniz. Soru sormak için buraya tıklayın.